【原理与应用】

苦味酸-天狼星红染色显示心肌纤维化鉴别胶原类型。在普通显微镜下，胶原纤维及网状纤维均被天狼星红染成深红色，胶原越粗，着色越红。天狼星红染色，在偏光显微镜下，【型胶原呈现红或黄色，Ⅲ型胶原呈绿色，色泽鲜明有利于对心肌纤维化、血管壁增厚程度进行分析。用于心肌梗死、高血压、糖尿病、胰岛素抵抗的心脏纤维化、血管外胶原的沉积及工、Ⅲ型胶原成分的定性、定量分析。

【试剂配制】

1%天狼星红饱和苦味酸液：天狼星红（Sirius red）1g，饱和苦味酸水溶液加至100ml。

【染色步骤】

1. 心脏、血管石蜡切片常规脱蜡（步骤同 Movat 染色步骤1~2）至水。

2. 入1%天狼星红-饱和苦味酸液1h。

3. 自来水洗 5min。

4. Mayer苏木素染液复染细胞核1min。

5. 自来水洗 10min。

6. 逐级乙醇脱水，50%→60%→70%→80%→90%→95%→100%。

7. 二甲苯Ⅰ、Ⅱ各透明15min。

8. 中性树胶封片。

【染色结果】

普通光镜下心脏、血管胶原纤维染呈红色，细胞核呈蓝色，偏光显微镜下，Ⅰ型胶原呈现红或黄色，Ⅲ型胶原呈绿色（图3-7-6，图3-7-7）。

【注意事项】

1. 1%天狼星红-饱和苦味酸液可反复使用。

2. 选用优质封片胶，偏光显微镜下封片胶容易出现白色斑点污染视野。