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特殊染色技术的应用——弹力纤维染色
[ 时间:2024-10-09 阅读:40次 ]
【原理与应用】
维多利亚蓝(Victoria blue,VB)的主要成分为含有丰富二硫键(R-S-S-R)的糖蛋白,又称为弹性蛋白,强嗜酸性易与染色液中的碱基结合,特异性着染弹力纤维,胶原纤维一般不着色。用于心内膜弹性纤维异常增殖和高血压小动脉壁增厚等显示。
【试剂配制】
维多利亚蓝染液配制:
1. 维多利亚蓝2g,糊精 0.5g,间苯二酚4g,蒸馏水200ml。将上述物质混合后加热煮沸,边煮边搅拌,约5min。
2. 用另一容器取30%三氯化铁水溶液25ml,加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中,继续煮沸3min,不断搅拌溶液呈胶体状。
3. 去火冷却过滤,将滤纸上的残渣连同滤纸放在60℃恒温箱中烤干。
4. 将烤干的深蓝色细颗粒状粉末,溶于70%乙醇液400ml中,后加浓盐酸4ml和苯酚5g,放置至成熟后使用。
【染色步骤】
1.石蜡切片常规脱蜡(步骤同Movat染色步骤 1~2)至70%乙醇。
2.切片入70%乙醇中洗2min。
3.切片浸入维多利亚蓝液中染,37℃过夜。
4.直接入95%乙醇中分色数秒。
5.入无水乙醇洗去多余染色液。
6.二甲苯透明。
7.中性树胶封固。
【染色结果】
弹性纤维呈蓝色,背景呈淡蓝色(图3-7-8)。
【注意事项】
1.维多利亚蓝液染色后用纸吸去附着的染液,直接进入 95%乙醇I、Ⅱ。
2.镜下控制分色,弹性纤维呈蓝色背景浅灰色或无色后立刻入无水乙醇I、Ⅱ。