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D-PAS染色
[ 时间:2024-10-21 阅读:8次 ]
【原理与应用】
此方法是在PAS法的基础上,用淀粉酶消化后再进行PAS染色,用于显示血管、毛细血管基膜、心肌细指褐素沉积。
【试剂配制】
1.1%淀粉酶:淀粉酶1g加蒸馏水至100ml。
2.Carnoy液(详见本章第九节)。
3.Schiff试剂配制(详见本章第九节)。
4.其他试剂与PAS相同。
【染色步骤】
1.石蜡切片置于二甲苯I、Ⅱ各15min。
2.无水乙醇I、Ⅱ→95%I、Ⅱ→90%→80%→70%→50%乙醇各1min。
3.自来水洗2min。
4.1%淀粉酶(amylase)消化10min。
5.自来水洗2min。
6.1%过碘酸水溶液氧化10min。
7.蒸馏水洗去过碘酸2minx2次。
8.Schiff试剂反应15min。
9.流水冲洗5~10min。
10.Mayer苏木素染液复染细胞核lmin。
11.自来水洗10min。
12.逐级乙醇脱水:50%→60%→70%→80%→90%→95%I、Ⅱ、无水乙醇I、Ⅱ各1min。
13.二甲苯I、Ⅱ各15min。
14.中性树胶封片。
【染色结果】
心肌血管基膜呈清晰紫红色,细胞核呈蓝色,心肌细胞核两端棕褐色颗粒为脂褐素沉积(图3-7-11)。
【注意事项】
1.配制好的Schiff试剂为无色,瓶盖要盖紧,用完放4℃冰箱保存,一旦变为粉红色应废弃。
2.1%过碘酸水溶液最好临用时配制,氧化时间不能超过15min。