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大鼠、小鼠主动脉根部及主动脉瓣定位切片方法
[ 时间:2024-08-05 阅读:85次 ]
一、定位切片目的
在心脏主动脉根部及主动脉瓣等4个截面进行定位切片,在同一切面统一规范取材制片,客观评价动脉粥样硬化斑块稳定性与不稳定性及其他心血管疾病的性质、程度、范围等。
二、取材方法
紧贴升主动脉根部离断心脏,立即放入10%中性甲醛液中固定48h后,从心耳下冠状面剖切心脏,进行脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。将心脏升主动脉根部切面向下包埋。每只鼠的心脏切4个切面,不用染色将蜡片直接在显微镜下对每个切面进行定位观察,未经染色的切片,每个切面在显微镜下形态学特点分别为:
(1)升主动脉根部横切面,升主动脉根部血管呈圆形。
(2)主动脉瓣附着部切面,主动脉壁附有3个分叉瓣芽。
(3)主动脉瓣起始部切面,主动脉瓣芽增宽延长。
(4)主动脉瓣融合部切面,3个主动脉瓣完全汇合在一起。
有时在主动脉瓣附着部及主动脉瓣起始部,还可见到冠状动脉的开口。一般每个切面可连续切取10~12张切片,用铅笔标好连续切片先后顺序。染色时每只大鼠选择同一个切面染,可用H-E、Movat、Masson、苦味酸-Sirius红染色等染色方法及免疫组织化学技术特异性显示动脉粥样硬化斑块中的多种结构成分:脂质、纤维帽厚、胶原纤维、泡沫细胞、蛋白聚糖、血管胶原纤维、弹力纤维等病理形态学改变,以及相关炎症因子、细胞因子、脂肪因子含量表达等对AS病变性质、程度进行定性定量客观综合评估(图3-5-1~图3-5-14)。