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特殊染色技术的应用——Masson 染色
[ 时间:2024-10-11 阅读:24次 ]
【原理与应用】
Masson染色显示胶原纤维为主的结缔组织呈绿色或蓝色着染,肌纤维呈红色,上皮成分淡红色,对比度清晰,适合用于心肌梗死、糖尿病、高血压模型心肌纤维化、血管周围纤维沉积的观察与图像定量分析。还可以用于心脏传导系统的定位染色,与观察心肌梗死区及梗死区周边新生血管的形成。心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)是指在心肌细胞外基质中,胶原纤维的过量积聚,胶原含量显著升高或胶原成分发生改变。MF包括2个基本类型:反应性纤维化(reactivefibrosis)和修复性纤维化(reparative fibrosis)。反应性纤维化是对心肌负荷或炎症的反应,常发生于血管周围,故称为血管周围纤维化(vascular fibrosis),常见于高血压左心室肥厚、肥厚型心肌病、主动脉瓣狭窄等;修复性纤维化是对心肌细胞坏死的反应,常发生于心肌的间质,常见于心肌梗死、心肌炎等。例如,心肌梗死后的修复性纤维化形成瘢痕。总之,心肌纤维化是心肌胶原合成与降解失衡的最终结果。
【试剂配制】
1. 1%丽春红液
丽春红2R 1g
双蒸水 99ml
冰乙酸 1ml
2. 1%酸性品红液
酸性品红 1g
双蒸水 99ml
冰乙酸 1ml
3. 1%亮绿液
亮绿 lg
双蒸水 99ml
冰乙酸 1ml
4. 1%磷钼酸水溶液
磷钼酸 1g
双蒸水 100ml
5. 3%氯化汞饱和苦味酸液 苦味酸1.3g加无水乙醇至100ml后,加入氯化汞 3g。
【染色步骤】
1. 石蜡切片脱蜡(步骤同Movat染色步骤1~2)至水,水洗 5min。
2. 3%氯化汞饱和苦味酸液固定40min,流水冲洗 10min。
3. 0.5%冰乙酸 1s。
4. 酸性品红十丽春红2R(1∶2)工作液 10min。
5. 0.5%冰乙酸 1s。
6. 1%磷钼酸 2s。
7. 1%亮绿复染 3min。
8. 0.5%冰乙酸I、Ⅱ各2s。
9. 无水乙醇I、Ⅱ、Ⅲ各 2s。
10. 二甲苯I、Ⅱ各透明 10min。
11. 封片胶封片。
【染色结果】
胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈橘红色(图3-7-5)。
【注意事项】
1. 饱和苦味酸氯化汞液固定40min,流水冲洗后及时染色。
2. 在染酸性品红十丽春红液及1%亮绿复染后,入0.5%冰乙酸液洗时液体量要充足并快洗,速洗后用纸吸净残留染液,避免染液之间串色,使染色对比度清晰鲜亮。
3. 1%磷钼酸水溶液及时更换新液。