细胞经原代培养、传代、换液等操作后均需进行动态性观察。一般应每日或隔日观察1次，对细胞生长过程出现的变化包括活细胞形态、数量改变、细胞移动情况等要及时记录、照相和采取相应措施进行处理，特别是如果能早期发现培养细胞出现的可能疑似为污染的情况，可以尽早地处理，最大限度地挽救回已污染的细胞并能防止污染的扩散。这样可以较为全面、细致的了解细胞生长变化概况。

（1）培养液：培养液的肉眼观察是常规检查的重要内容，重点观察培养液的颜色和透明度的变化。一般培养液中均含有酚红作为指示成分，以此来显示培养液的pH值。正常新鲜的培养液为桃红色，这种颜色代表培养液的H值大约为7.2~7.4。加入细胞进行培养后由于细胞代谢产生酸性产物，使培养液pH值下降引起颜色变浅变黄。一旦发现培养液变黄，说明培养液中代谢产物已堆积到一定量，需换液或传代处理。一般正常情况生长稳定的细胞需每2～3d换液1次，生长慢的细胞需3～4d换液1次。目前细胞培养多采用恒温CO₂，孵育箱，这样使pH值相对稳定，可以很好地监控培养环境的温度、湿度等，有利于细胞生长。传代和换液后，如果发现培养液很快变黄，要注意以下几点：是否有细菌污染发生；培养器皿是否未洗干净，有残留物；细胞生长是否很快或接种数量是否较大。在以上3种条件下，培养液会很快变色。培养液正常为清亮透明，出现混浊多为污染（悬浮细胞培养除外）。

（2）细胞生长概况：常规检查应特别注意细胞的生长增殖变化。原代培养和传代培养后，绝大多数细胞并不马上开始增殖，都经历一段时间的适应或潜伏期，其时间长短不同。细胞系细胞一般时间很短，多为24h以内；原代培养潜伏期较长，从几天到数周不等。一般胚胎组织细胞生长的潜伏期较短，而成年组织细胞和部分癌组织潜伏期较长。原代培养中最先可见从组织块边缘“长出”细胞，这些细胞通常并不是增殖产生而是从原代组织块中游走出来。原代细胞培养的早期较少见到分裂细胞。最早游出的细胞多以成纤维样细胞为主，成纤维细胞是最易生长的细胞，生长速度快，适应性强，细胞为细长梭形，多为放射状和旋涡状分布，有时互相连接成网状。上皮样细胞通常生长速度较慢，细胞零星游走出来后，逐步分裂繁殖，呈岛状生长，并逐步汇合成片，称铺路石样形态。

细胞传代后，经过悬浮、贴壁伸展进入潜伏期，然后开始生长进入对数生长期，细胞开始大量繁殖，逐渐相连成片而长满瓶底。贴壁生长的细胞在长满瓶底80%就应及时传代，否则细胞可由于营养物质缺乏、代谢产物的堆积以及细胞的接触密度抑制等，进入平台期并衰退。这时细胞轮廓增强，细胞变得粗糙，胞内常出现颗粒状堆积物。严重时细胞甚至可从瓶壁脱落。悬浮生长的细胞当增长迅速、培养液开始变黄时也应及时传代。

（3）细胞形态变化：经传代或换液后生长状况良好的细胞在显微镜下观察时透明度大、折光性强、轮廓不清；用相差显微镜观察能看清部分细胞细微结构，细胞处于对数生长期时可以见到很多分裂期细胞。细胞生长状态不良或衰老时，细胞折光性变弱，轮廓增强，胞质中常出现空泡、脂滴、颗粒样物质，细胞之间空隙加大，细胞变得不规则，失去原有特点，上皮样细胞可能变成纤维样细胞的形状，有时细胞表面和周围出现丝絮状物，如果情况进一步严重，可以出现部分细胞死亡、崩解、漂浮。只有生长状态良好的细胞才适合进一步传代和实验。对生长状态不良的细胞首先要查明原因，采取相应措施进行处理，如换液、排除污染等。

（4）微生物污染：细菌和霉菌的污染多发生在传代、换液和加药等操作之后因而在进行上述操作后24～48h要密切注意是否有污染发生。微生物污染最典型的表现为培养液混浊，液体内漂浮真菌丝或细菌。尤其要注意低毒微生物污染情况，例如，最常见的酵母菌污染，在镜下注意观察细胞之间存在细小的、透亮的、成簇的、呈卵圆形酵母菌。通常酵母菌与培养细胞竞争消耗营养物质，导致细胞生长缓慢。如是支原体污染则不同，一般传代稳定、生长规律的细胞系，如培养条件没有改变而细胞生长却明显变缓、胞质内颗粒增多、有中毒表现，但培养液多不发生混浊，即可考虑为支原体污染。必要时，进行支原体鉴定，如扫描电镜观察、RT-PCR 检测等。